(株)バイオエネックス ルシフェラーゼ FM プラス取扱説明書
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» ル シ フ ェ ラー ゼ FM プラ ス Beenerine BIOemeX nc (株 ) バ イオ エネ ックス ( 高 感度 ATP 検出 キッ ト ) ル シ フ ェ ラー ゼ FM プラ ス 取 扱 説明 書 製品 名 : ル シ フ ェ ラー ゼ FM プラ ス ( 高 感度 ATP 検出 キッ ト ) Code : BENXO0010 内 容量 : 80 回 分 価 格 : \40.000- 束 据 元 : 株 式 会 社 バ イオ エネ ックス 保存 方 法 : 4 C に て 暗 所 保存 田内 容 ・ ル シ フ ェ ラー ゼ FM プラ ス 酵素 試 楽 凍結 乾燥 品 (40 回 x2 本) ・ 滅菌 水 30ml 画 詩 品 対 明 ホタル 由来 の ル シ フ ェ ラー ゼ は 、 ア デ ノ シ ン ニ リン 酸 (ATP) と D- ル シフ ェ リ ン か ら 、 高 効 率 で 光 を 発生 させ ます 。 こ の 生物 発光 技術 は ATP の 検出 に 応用 され て いま す 。 ル シフ ェ ラ ー ゼ FM プラ ス ( 高 感度 ATP 検出 キッ ト ) は 、 当 社 製品 ル シ フ ェ ラー ゼ F M に より 蓄積 し た 高 感度 ATP 検出 技術 を も と に 、 簡 便 に ATP を 高 感度 測定 で きる よう に し た キッ ト で す 。 本 製品 と 市 販 の 発光 測定 装置 を 組み 合わ せる こと に より 、 誰 で も 科 単 に 高 感度 な ATP 測定 検査 が 可能 で す 。 ATIP AMP+PPI Oe A 今 Luciferin Oxy-luciferin + ムカ y Luciferase ( 図 1) ホタル ル シ フ ェ ラー ゼ に よる 発光 反応 画 標 準 プ ロト コー ル 使用 例 1 ) ATP の 定量 実験 手順 ① 発光 試薬 の 調製 1. _ LUCIFERASE FM プラ ス 凍 結 乾 燥 品 に 超 汰 菌 水 2 mL を 加え る 。 2. 5 分 ほど 室温 で 静 置 し た 後 、 検 出 試薬 を よく ピペット を 用 いて 提 持 する 。 » ル シ フ ェ ラー ゼ FM プラ ス OT (株 ) バ イオ エネ ックス ( 高 感度 ATP 検出 キッ ト ) ② ATP の 定量 (検体 数 が 少な い 場 合 ) ① で 調製 し た 発光 試薬 45uL を ルミ チュ ー ブ (キッ コー マン ) に 入れ 、 調製 し た ATP 溶液 5 uL を 加え 、 発 光量 を 測定 する (発光 量 は 添加 後 5 秒 後 を ビー ク に 減少 し ます 、 す みや か に 計 測 し て くだ さい ) 。 ル ミ テ スタ ーC-1000 (キッ コー マン 、 測 定時 間 10 秒間 ) で 測定 し た 結 果 を 示す 。( 図 2) 。 ②' ATP の 定量 (検体 数 が 多い 場合 ) 調製 し た ATP 溶液 5 uL を 96 穴 マ イク ロ プ レー ト (Nunc、 黒 ) に 入れ 、① で 調製 し た 発光 試薬 45uL を イン ジェ クタ ー か ら 加 えた 時 の 発光 量 を 、ARVO MX (パー キン エル マー、 測 定 時 間 5 秒間 ) で 測定 する 。 10.000.000 1.000.000 つ ー」 選 100.000 中 10.000 pe 生物 発光 1.000 100 0 | 10 100 1.000 10,000 ATP (amol/ 測 定 ) ( 図 2) ATP 検量 線 使用 例 2) 高 感 度 発光 試薬 に よる 微生物 ATP 測定 実験 手順 ① 発光 試薬 の 調製 I LUCIFERASE FM プラ ス 章 結 乾 燥 品 に 超 汰 菌 水 2 mL を 加え る 。 2. 5 分 ほど 室温 で 静 置 し た 後 、 検 出 試薬 を よく ピペット を 用 いて 携 挫 する 。 ② 微生物 検体 の 調整 1. 微生物 懸 濁 液 を 1. 5mL 微量 遠心 管 に 0.5mL 採取 し 、 遠 心 (15.000rpm, 3min、 室 温 ) し て 上 清 を 棄て る 。 2. 沈殿 に 添付 の 汰 菌 水 0.5mL を 加え 懸 汐 後 、 再 び 遠 心 (15.000rpm, 3min、 宝 温 ) し て 上 清 を 棄て る ( 菌 体 洗浄 ) 。 » ル シ フ ェ ラー ゼ FM プラ ス EDEN (株 ) バ イオ エネ ックス ( 高 感度 ATP 検出 キッ ト ) 3. 再度 、 沈 殿 に 減 菌 水 450uL を 加え 懸 漁 し 、50uL の ATP 抽出 液 (0.1% 塩 化 ベ ン ザ ル コ ニ ウ ム 溶 液 、 添 付 の 滅菌 水 で 調製 ) を 加え て 室温 で 5 分間 静 置 す る 。 4. これ を 測定 用 試料 と する 。 ③ 微生物 ATP の 定量 (検体 数 が 少な い 場 合 ) ① で 調製 し た 発光 試薬 45uL を ルミ チュ ー ブ ( キ ッ コ ー マ ン ) に 入れ 、② で 調製 し た 菌 体 ATP 試料 5 uL を 加え て 発 光量 を 測定 する 。 ル ミ テ スタ ーC-1000 (キッ コー マン 、 測 定時 間 10 秒間 ) で 測定 し た 結果 を 示す 。( 図 3) 。 ③' ATP の 定量 (検体 数 が 多い 場合 ) ② で 調製 し た ATP 溶液 5 uL を 96 穴 マ イク ロ プ レー ト (Nunc、 黒 ) に 入れ 、① で 調製 し た 発光 試薬 45buL を イン ジェ クタ ー か ら 加 えた 時 の 発光 量 を 、ARVO MX (パー キン エル マ ー、 測 定時 間 5 秒間 ) で 測定 する 。 1.000.000 = 100.000 = 野生 型 ル シフ ェ ラ ー ゼ M 上 10000 中 計 直 ]0o0 100 0 ] 100 10.000 微生物 細胞 数 (CFU/assay) ( 図 3) 微生物 ATP 量 の 測定 ここ に 示し た 実験 結果 は 参考 で あり 、 酵 素 活性 や ATP 検出 性 能 を 保証 する も の で は あり ませ ん 。 注 1) ル シ フ ェ ラー ゼ に よる 発光 反応 は 、 温 度 や サン プル の 組成 に よっ て 発光 量 が 変化 し ます 。 一 保存 開封 前 : 直 財 日 光 を 避け 、4C (長期 保存 の 場合 -18C) で 保存 し て くだ さい 。 開封 後 : 酵素 溶液 を 調製 し た 後 は 水上 で 取り 扱い 、 な る べく 速やか に 使用 し て くだ さい 。 溶液 状 態 で 保存 し た 場合 、 上 酵素 活性 が 低下 する た め 、 開 封 後 は 一 度 で 使い 切る こと を お 勧め し ます 。 も » ル シ フ ェ ラー ゼ FM プラ ス OT (株 ) バ イオ エネ ックス ( 高 感度 ATP 検出 キッ ト ) し 保存 され る 場合 、 活 性 を 保証 で きま せん が 、 小 分 けし て -18C で 保存 くだ さい 。 画 廃 棄 本 製品 の 容器 は ガラ ス 、 ゴ ム 、 プ ラス チッ ク の 材質 か ら な っ て いま す 。 ま た 、 包 装 材 は ポリ エ ステ ル 、 ア ルミ 、 ポ リエ チレ ン の 三 層 フィ ルム 製 、 酸素 吸収 剤 は 金属 紛 、 乾燥 剤 は シリ カゲ ル か ら な っ て いま す 。 廃棄 の 際 は 、 各 種 分 別 し 、 都 道 府 県 、 市 町 村 が 定め る 廃棄 物 の 適正 処理 に 従い 廃棄 処理 し て くだ さい 。 一 取り 扱い 上 の 注意 本 製品 は 日 本 国内 に お ける 研究 用 途 に 限り ます 。 使用 期限 が 切れ た 製品 は 使用 し な いで くだ さい 。 本 製品 は 凍結 乾燥 後 、 際 圧 で 密栓 し て あり ます 。 ゴ ム 析 を 強い 力 で 開け ます と 、 人 急激 に 空 気 が 入 り 込 み 、 内 容 物 が 飛散 する 坊 れ が あり ます の で 、 ゆ っ くり と ゴム 析 を 持ち 上 げ 、 切 り 込 み 部 分 か ら 空 気 を 入れ る よう に し て 開 欄 し て くだ さい 。 本 製品 は 研究 用 試薬 で す 。 ヒ ト 、 動 物 へ の 医療 、 了 臨床 診断 に は 使用 し な いよ う ご 注 意 く だ さい 。 ま た 、 食 品 、 化 粧品 、 家 庭 用 品 な ど と し て 使用 し な いで くだ さい 。 本 製品 の 試 楽 類 を 使用 前 後に 口 に 入れ た り 、 素 手 で 触れ た り 、 目 に 入れ た り し な いで くだ さい 。 口 に 入れ た 場合 は 、 口 を よく すす い だ 後 、 皮 膚 に つい た 場合 は 、 大 量 の 水 で 洗浄 し た 後 、 ま た 目 に 入れ た 場合 は 大 量 の 水 で 洗浄 し た 後 、 医 師 に 連絡 を 取り 、 指 示 を 受け て く だ さい 。 本 製品 の 容器 及び 試薬 が 食品 な ど へ 混入 し な いよ う 、 保 管 、 廃 棄 に 充分 ご 注意 くだ さい 。 本 製品 は 幼児 の 手 の 届 か な いと ころ に 保管 し て くだ さい 。 画 償 計 名 造 元 で は 、 本 製品 に 不具 合 が あっ た 場合 代替 の 製品 を 提供 する 事 を 保証 し ます が 、 そ れ 以 外 の 保証 は いた し ませ ん 。 製造 元 は 特別 な 、 若しくは 結果 と し て 生じ る 損害 また は 間接 的 に 生じ る 費用 を 含む いか な る 損害 に も 責任 は 負い ませ ん 。 人 製造 元 ・ お 問い 合わ せ 先 : 株 式 会 社 バ イオ エネ ックス 〒739-0046 広島 県 東 広島 市 鏡山 3 丁目 10-31 広島 大 学 産学 連携 セン ター イン キュ ベー ショ ン オ フィ ス 内 TEL・FAX : 082-421-3/758 E-mail: “[email protected]